高效液相色谱仪检测分析中药材(酸枣仁)中黄曲霉毒素
黄曲霉毒素(AFT)是一类化学结构类似的化合物,均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 (aspergillus flavus))寄生曲霉 (a.parasiticus))产生的次生代谢产物,在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率。
一、高效液相色谱仪检测黄曲霉毒素实验材料:
1.1免疫亲和柱:博纳艾杰尔黄曲霉毒素总量免疫亲和柱 订货号:HC09001 1.2色谱柱:Venusil MP C18 (4.6*150mm, 5μm),订货号:VA951505-0
二、高效液相色谱仪检测黄曲霉毒素实验方法:
1.1混合对照品溶液的制备 精密量取黄曲霉毒素混合标准品(黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2标示浓度分别为1. 0μg/mL、0.3μg/mL、1.0μg/mL、 0.3μg/mL)1mL,置10mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,作为储备液。精密量取储备液1mL,置50mL量瓶中,用70%甲醇溶液稀释至刻度,即得。
1.2供试品溶液的制备 取供试品粉末约10g,精密称定,加入氯化钠2g,精密加入70%甲醇溶液100mL,超声处理20分钟,离心5分钟(离心速度8000转/分),精密量取上清液10mL,置50mL量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取25mL,通过免疫亲和柱,流速每分钟2-3mL,用水5mL淋洗,洗液弃去,使空气进入柱子,再用甲醇1.4mL分2次洗脱,收集洗脱液,用水定容至2mL,即得。
1.3测定法 分别精密吸取上述混合对照品溶液20μl、供试品溶液20μl,注入液相色谱仪,测定峰面积,从标准曲线上读出供试品中相当于黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的量,计算,即得。
三、高效液相色谱仪检测黄曲霉毒素色谱条件:
仪器:高效液相色谱仪(LC600) 荧光检测器:光化学柱后衍生装置(南京科捷) 色谱柱:Venusil MP C18 (4.6*150mm) ,定货号:VA951505-0 进样量:20μl;柱温:40℃;流速:1.1mL/min
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