铁皮石斛/铁皮石斛栽培管理/铁皮石斛栽培    武汉卉丰园

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栽培管理铁皮石斛栽培管理
就铁皮石斛栽培地区的选择而言，我认为应根据铁皮石斛的生物学特性，充分考虑场地的光照、温湿度  野生状态下的铁皮石斛小太阳
、
  泰宁县丹霞地貌拍摄到的野生铁皮石斛小太阳

  野生状态下的铁皮石斛小太阳

  铁皮石斛小太阳
通风等自然因素(一般选择有野生铁皮石斛分布的地区)。为了获得高产、优质的铁皮石斛，必须做到规范化种植、集约化栽培，人为创造一个优越的生长环境，使种植条件基本接近其野生的环境气候条件，以满

铁皮石斛花(6张)足它的生长需要。一般在温室中苗床上种植，这样很多因素都可以进行人工控制。  铁皮石斛详解图
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1.栽培前的准备工作
1.1栽培设施的选择
栽培温室的建立一般要满足以下条件：棚的大小要根据种植规模的大小合理设计，温室一般长30m、宽6 m（或者8m），肩高1．8 m，总高4 m左右；种植苗床之间要预留宽l m左右的道路，方便管理。温室构建可选择钢构骨架，耐用，但一次性投入成本较高；也可选择水泥柱搭建，一次性投入成本较低，但寿命短，多年后总成本不比前者低。棚顶覆盖塑料无滴薄膜和遮荫度为70%的遮荫网，大栅四周和人口装上防虫网。育苗大棚要通水、通电、通路。且在棚内安装自动或手动控制的喷雾系统(喷雾、喷肥、喷药)。
1.2苗床的准备
棚内搭建高架种植苗床，使其能够轻松控制水分，并透气。从而为组培苗的生长提供有利条件。可用角钢、木条等材料作为苗床的框架，苗床长度跟温室一样，宽1．2 m．架空高度40 Cm左右。床与床之间配有通道，以便栽培操作。若为了充分利用大棚空间，栽培床也可采用手摇活动式苗床，这样留一个通道，既可增加栽培面积，也可以满足操作的要求。栽培床底部一般采用钢丝网铺设，为了使基质不从空隙间漏出，在钢丝网上铺设一层40目的防虫网。然后，将准备好的基质倒于栽培床上，厚度为7-15cm。

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1.3基质的准备
基质的选择对铁皮石斛移栽的成活率、生长、繁殖和产量影响很大，因此移栽前基质的选择至关重要。可用于铁皮石斛移栽的基质多种多样。不同的研究人员得到的基质种类也有所不同。袁正仿等分别用河沙粗麻石、碎砖石、珍珠岩(100%)、珍珠岩+椰糠(1：1)，椰糠(100%)、泥炭土(100%)栽种铁皮石斛组培苗，结果发现，以泥炭土的效果，椰糠和珍珠岩+椰糠次之，其他效果较差。付开聪等认为，在几种基质中，不论是铁皮石斛的成活率、产量、粗状程度还是高度，均以木块+苔藓的组合的效果，生长优劣情况表现为：木块+苔藓>木块+锯末>木块+腐质土>锯末+河沙>锯末+腐质土。白美发等将铁皮石斛无菌试管苗(苗高5 cm)分别移栽石灰岩碎石滤水层5 cm+腐叶土8 cm+活苔藓2cm、石灰岩碎石滤水层5 cm+碎苔藓8 cm+活苔藓2 cm、石灰岩碎石滤水层5 cm+锯末8 cm+活苔藓2 cm等栽培基质中，结果发现以石灰岩碎石滤水层5 cm+锯末8 cm+活苔藓2 cm为基质时铁皮石斛长势、产量。邓君浪采用2 cm大小的木块与苔藓按4：1的比例混合使用，经过高温消毒灭菌，在使用前用清水浸泡24小时，使其充分吸水，取得了较好的结果。以上几种基质，各地栽培人员根据不同的实际进行选择。

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2.定植
据研究，组培苗根长在0．5-1．0cm时是移植的时期。栽培前，将铁皮石斛组培苗放在室内炼苗20～25天后，用清水洗净组培苗根上的培养基，用0．1%的百菌清液消毒，以防组培苗根腐烂。栽培时，按15 cm×20 cm的株行距种植，种植时使根系自然舒展，将基质覆盖住根为宜，轻轻提苗，使苗根系能与基质充分接触，浇足定根水。铁皮石斛为丛生植物，多株种植比单株种植长势更好，以3株1丛种植更适宜。栽培时间以3～6月为宜，其间栽培组培苗成活率较高，可达95%以上，且生长健壮。
移栽时间气温过低或过高时均不宜移栽。在铁皮石斛主产地，一般来说，除最冷的1—2月和最热的7。8月外均可移栽，但一般选择4—5月。云南普洱地区铁皮石斛栽培季节顺序依次为：3月中旬至6月中旬>9月上旬至11月下旬>6月下旬至l0月下旬>12月上旬至次年3月上旬。
移栽方法移栽时可在基质上挖深2—3 cm的小洞。轻轻将炼苗、出瓶洗净后的组培苗根部放人小洞．注意不要弄断石斛的肉质根，然后用基质盖好。付开聪等研究发现，在生长季节移栽．铁皮石斛试管苗的大小与成活率关系不明显，而产量与试管苗长粗关系极为明显；他进一步分析认为．苗小与体内积存的有机物和能量都较少有关，小苗适应外界的能力和抵抗力都很差，生长较为缓慢。所以应将裸根苗、少根苗和污染苗与正常苗分开栽培，以便管理。

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3．温室条件管理
(1)光照 铁皮石斛为耐蒴性较强的附生植物，在上午10时前有直射光为佳，其余时间需有20%～30%的散射光。在温室大棚一般采用75%的活动遮荫网。夏季适当增加遮光度，避免因光线过强而使叶面变黄脱落，冬季应适当增加光照强度，避免因光照不足而造成叶片生长柔弱。铁皮石斛生长的最适光照强度为5 000—10 000 lux。
(2)温、湿度 大棚内温度白天保持在25～30℃，夜晚15—20℃，低温不要低于8℃，高温不要高于35℃。湿度控制在60%～80%，若夏天高温低湿，可采取遮荫及微喷等措施进行降温加湿，但在保温的同时要注意通风，特别是夏天高温天气，更要注意空气流通，防止病虫害的发生；冬季气温低时，可通过加温控制其在10℃左右即可。移栽后1周内空气湿度宜保持在90%左右，1周后空气湿度可保持在70%～80%。
(3)水分 在刚定植完的1个星期内，保持基质处于湿润状态，但不积水。喷水仅用于增加空气湿度，防止叶面水分过度蒸腾而引起萎蔫。在新根萌动后，以间干间湿的原则进行浇水，一次浇足后，待基质表层发白后再浇，不能浇半吊水。不同季节浇水量也不同，夏天气温高、蒸发量大，基本上需要天天浇水；冬天温度低、水分不易散失，因而需根据基质含水量而定，栽培基质若偏干可补充一些水分。
(4)肥料 铁皮石斛气生根的营养主要靠根系的兰菌固定空气中的游离氮，但是施加适当的肥料能促进茎部增大，叶片肥壮。在新根萌动后即可开始喷施液体肥，如磷酸二氢钾液，或磷酸二氢钾加尿素液等，浓度均为0．1%左右，一般10天左右喷施1次。1～2个月后，待移栽苗已逐渐适应新的环境，新根已长出lOcm左右时，可以施加缓效颗粒肥，帮助其茁壮成长。

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朱艳等认为，组培苗移植15 d后施放1/2倍营养液为。白美发等研究了铁皮石斛施用营养液(主要由硝酸钾、硫酸铵、硫酸镁、硫酸铁和磷酸二氢钾等组成．浓度为0．2%)对铁皮石斛产量的影响，结果表明．浇灌适当浓度的营养液可较大幅度地提高铁皮石斛的产量。铁皮石斛常用的肥料为叶面肥，白美发认为喷施叶面肥(N：P205：K20=25：13：13，其N、P、K总含量为51%，微量元素B、Fe、Zn、Cu、Mn、Mo总含量为l%)可促进铁皮石斛茎叶伸长生长，茎节、直径加长加粗，平均单株鲜重明显高于对照。
(5) 植物生长调节剂 付开聪等研究认为，施用外源生长素(如GA<赤霉素>、6-BA)对促进产量效果明显；滕建北等研究表明。激素处理能增强活性氧清除剂的活性，降低膜脂过氧化作用产生的MDA，有助于提高铁皮石斛的抗逆性。莫昭展等认为，在低浓度条件下，随着ABA（脱落酸）浓度的增加，原球茎的增殖速度加快，当ABA浓度为0．5mg/L时增殖。
(6)病虫害防治 
铁皮石斛的主要病害有软腐病、黑斑病、炭疽病等。软腐病发病快，严重时整株腐烂解体呈湿腐状；黑斑病危害叶片，使叶片枯萎；石斛炭疽病危害叶片及肉质茎。受害叶片出现黑色或褐色病斑。针对这些常见病害要加强棚内管理、注意通风透光、适当降低棚内湿度，及时施药并拔出病株带离。
铁皮石斛的主要虫害有蜗牛、菲盾蚧、红蜘蛛等。其中，蜗牛是常见害虫，危害幼茎、嫩叶、花蕾和幼果。可用诱杀、人工捕杀或撒石灰、茶麸防治；石斛菲盾蚧寄生于植株叶片边缘或背面吸食汁液，可将集中有菲盾蚧的老枝烧毁或用40%乐果乳油l 000倍等喷雾杀灭：红蜘蛛可通过清除周边环境的杂草或喷低毒杀螨剂800一l 000倍防治。

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铁皮石斛为珍贵药材，因此铁皮石斛的病虫害防治应尽可能以预防、物理防治和生物防治为主，防治的原则是防重于治。不用或采用低毒农药：一旦发现有病虫害应及时采取相应措施，避免病虫害情的加重。[8]
编辑本段栽培要点人工栽培
由于黑节草野生资源贫乏，自70年代初期，许多单位便组织人工引种栽培的研究，但由于黑节草繁殖难、成活率低、气候条件要求严格等原因，大面积栽培仍未成功。中国科学院昆明植物所和云南思茅地区民族传统医药研究所通过17年的前后攻关，1992年终于使难繁殖的黑节草长出了幼苗。
据报道，黑节草难繁殖的根本原因在于种粒极其微小，肉眼难以分辨，每毫克干品黑节草种子含有600粒种子，种皮较薄，种子内含的营养物质非常微小；另一方面，从种子萌发至形成幼苗需60～90 d，形成根，并能自氧生活还需培养到120 d以上。因此，在气候多变的外界环境条件下，萌发种子尚未形成小苗就变腐变质了。据分析，黑节草成活率低主要原因是难以生根，这与黑节草自身品种的遗传有关。黑节草为气生根植物，根系不发达，形成的根也较为光滑，在显微镜下看根部毛孔和根毛都较少，而茎多有密集坚裂或横破，叶片上下两面都布满了气孔。由此可以看出黑节草的植物营养主要是靠空气中的养分供给，所以黑节草在人工栽培或野生条件下都要求有较适宜的外界环境才能生长成活。
笔者在试验中，利用不同浓度、不同剂型的激素在上述条件下对黑节草生根情况进行对比培养，多数都影响不大，只有0.001 %的萘乙酸对扦枝条的生根有一定作用。我们试验的结果认为黑节草的正常生长不在于供给营养物质的多少或各种激素类型，最关键的是要给予适宜的外界条件和精心的人工护理。

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组织培养与快速繁殖
利用植物组织培养实现快速繁殖是黑节草人工集约化栽培繁殖幼苗的途径。研究表明，以种子为外植体诱导的愈伤组织分化能力最强。从不同激素种类和浓度的组合对愈伤组织再生和分化的效果看，在中科院上海植物生理研究所王光远等人试验成功的MS附加0.3 mg/L NAA的培养基上繁殖形成原球茎，再转入浙江省医学科学院张治国等人实验成功的1/2 MS+20 %马铃薯提取液+2 mg/L BA+0.2 mg/L NAA+2 %蔗糖+6 %琼脂上分化，最后我们用1/2 MS+5 %活性炭直接生根效果较为理想，因此利用种子诱导愈伤组织，然后分化成植株的方法，可作为快速繁殖黑节草的有效手段。
细胞培养
我们应用1/2 MS+2 mg/L BA+3 mg/L NAA进行黑节草大规模细胞繁殖，预想利用细胞繁殖的手段来得到黑节草的植物原料。实验证明，该手段较为成功，细胞繁殖快，培养60 d后就可以使原细胞组织增加70～100倍。但是对利用细胞培养所得的黑节草原料进行成分分析和临床使用，从成分上看，95%都为初生物质，石斛碱含量为0，多糖种类和数量都较少，结构简单。临床使用模仿成品加工，无药味。干品原色洁白，服用后也不起药效，次生物质较少，至于利用何种较接近的手段培养次生物质获得药效，尚待进一步的研究。 
黑节草野生资源濒临枯竭，必须进行物种保持和人工大面积集约化栽培是今后对黑节草资源的开发与应用的重要途径。目前已摸清解决了黑节草繁殖难和成活率低的两大难题，需要政府及有关部门的大力支持，进一步完善和发展组织培养快繁育苗以获大量的种苗，同时在环境适宜的地区开辟种植基地，进行科学的管理，以满足市场需求和提供市场药源；另一方面不断进行细胞培养实验，以缩短种植周期，降低成本，最终使其产生商业价值。此外，对黑节草的有效药用成分及含量等还需进一步深入研究。[9]

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编辑本段科研方法1、糖测定方法苯酚—硫酸法
仪器：751GW—紫外可见分光光度计
标准曲线的绘制：精密称定105℃干燥至恒重的标准蔗糖10.0mg，置100ml容量瓶中，加水适量使溶解并稀  泰宁丹霞地貌野生状态下的铁皮石斛小太阳
释至刻度摇匀。精密吸取多糖标准液0.5、0.6、0.7、0.8、0.9ml于10ml量瓶中，各加水至2.0ml，再各加苯酚试剂1.0ml，摇匀，迅速加入浓硫酸5.0ml，迅速摇匀，放置5min，置沸水浴加热20min取出，迅速冷却至室温，同时作空白对照，于490nm波长处测吸收度，绘制标准曲线，求得回归方程，C=19.38A+1.22r=0.9993
铁皮石斛粗多糖的含量测定：精密称取铁皮石斛初多糖20.0mg,置50ml容量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度摇匀。精密吸取粗多糖液0.5ml，加水至2.0ml，以下按多糖标准曲线绘制中“再加苯酚试剂1.0ml”操作，测得吸收度代入回归方程。
多糖百分含量%=(19.38A+1.22)V1/1000V2C×100%[10]　
2、铁皮石斛多糖分析
石斛的糖类成分不仅对动物和人体有生理活性，而且它是植物组织培养的一种重要调节剂。铁皮石斛多糖促进滇紫草（OnosmapaniculatumBur.etFranch．）细胞合成紫草素，其最适浓度为0.05%～0.1%，大于最适浓度紫草素的合成逐渐受到抑制。铁皮石斛寡糖素有利于西洋参细胞的生长和皂甙含量的提高，尤其能增加Rg组皂甙的含量。诱导马铃薯试管结薯的效果比较试验表明，加入10mg/L铁皮石斛寡糖素时，试管结薯的数量略超过500mg/L矮壮素的效果。铁皮石斛寡糖素还能促进西洋参和人参对愈伤组织的生长和皂甙的合成，其促进西洋参愈伤组织皂甙合成的最适浓度为10mg/L，皂甙产率为14.53mg/flask,明显高于对照8.22mg/flask；其促进人参愈伤组织皂甙合成的最适浓度为5mg/L，皂甙产率为10.48mg/flask，明显高于对照6.65mg/flask。
编辑本段化学成分成分组成

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利用多种色谱方法，从铁皮石斛药材分离出单体化合物72个，通过现代波谱技术鉴定了63个，发现新化合物18个，所得化合物的结构类型如下。  铁皮石斛(图5)
苯类及其衍生物共27个：铁皮石斛素A，铁皮石斛素B，铁皮石斛素C，铁皮石斛素D，铁皮石斛素E，铁皮石斛素F，铁皮石斛素G，铁皮石斛素H，铁皮石斛素I，铁皮石斛素J，铁皮石斛素K，铁皮石斛素L，铁皮石斛素M，铁皮石斛素N，铁皮石斛素O，铁皮石斛素P，铁皮石斛素Q，4,4′-二羟基-3,5-二甲氧基联苄，3,4-二羟基-5,4′-二甲氧基联苄，3′-羟基-3,4,5′-三甲氧基联苄，4,4′-二羟基-3,3′，5-三甲氧基联苄，3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄，3′，4-二羟基-3,5′-二甲氧基联苄，二氢白藜芦醇，dendromoniliside E，denbinobin，2,4，，7-三羟基-9,10-二氢菲。
酚类化合物12个：N-p-香豆酰酪胺，反-N-（4-羟基苯乙基）阿魏酸酰胺，二氢松柏醇二氢对羟基桂皮酸酯，二氢阿魏酸酪胺，对羟基苯丙酰酪胺，丁香酸，丁香醛，香草酸，对羟基苯丙酸，对羟基桂皮酸，阿魏酸，对羟基苯甲酸。
木脂素类化合物4个：(+)-丁香脂素-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，icariolA_2-4-O-β-D-glucopyranoside，(+)-lyoniresinol-3a-O-β-D-glucopyranoside，及裂异落叶松脂醇。

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内酯类化合物2个：钩状石斛素和洋地黄内酯。
二氢黄酮类化合物2个：柚皮素和3′，5,5′，7-四羟基二氢黄酮。
其他类型化合物16个：铁皮石斛素R，erigesideⅡ，腺苷，尿苷，蔗糖，5-羟甲基糠醛，koaburaside，反式阿魏酸二十八烷基酯，对羟基反式肉桂酸三十烷基酯，对羟基顺式肉桂酸三十烷基酯，胡萝卜苷，β-谷甾醇，十六烷酸，十七烷，三十一烷醇，及十七烷酸。
18个新化合物为：铁皮石斛素A，铁皮石斛素B，铁皮石斛素C，铁皮石斛素D，铁皮石斛素E，铁皮石斛素F，铁皮石斛素G，铁皮石斛素H，铁皮石斛素I，铁皮石斛素J，铁皮石斛素K，铁皮石斛素L，铁皮石斛素M，铁皮石斛素N，铁皮石斛素O，铁皮石斛素P，铁皮石斛素Q，及铁皮石斛素R。
对部分单体化合物进行了抗氧化和抗肿瘤活性初筛，发现大多数联苄类化合物具有抗氧化活性；有2个联苄类化合物具有抗肿瘤活性。[11]　

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